Utilisation des langues pour surveiller le virus SDRP

La surveillance de la présence du virus du SDRP dans les élevages de truies est utilisée pour classer le statut de l'élevage. Le système d'échantillonnage et de classification classique le plus courant est basé sur celui développé par Holtkamp, ​​et al (2011) avec un prélèvement de sang une fois par mois pendant plusieurs mois consécutifs. Selon ce protocole, un élevage est considéré :

• Indemne lorsque les reproducteurs sont séronégatifs en ELISA
• Positif stable lorsque pendant 90 jours aucun porcelet virémique n'a été détecté par la technique PCR chez les animaux au sevrage
• Positif instable lorsque la présence de virus dans un tissu a été détectée et sans atteindre le minimum de 90 jours de résultats de PCR négatifs pour pouvoir être considéré comme positif stable.

Parallèlement, la surveillance peut être utilisée pour évaluer l'efficacité des mesures de contrôle introduites après une épidémie en reproduction. Dans ce cas, l'objectif initial est d'obtenir une stabilité à la naissance évaluée comme l'absence de virus dans tout tissu de porcelets nouveau-nés. Le deuxième objectif est d'atteindre la stabilité au sevrage et enfin, s'il y a la phase de post-sevrage dans l'élevage à surveiller, l'absence de virus dans l'échantillonnage des porcelets en fin de post-sevrage.

De nouveaux types d'échantillons pour la surveillance du SDRP

Après quelques années d'utilisation exclusive du sang comme type d'échantillon dans la surveillance du SDRP, de nouveaux systèmes d'échantillonnage de populations plus importantes telles que les liquides oraux avec des cordes ont été développés, largement utilisés chez les porcs en post-sevrage et en engraissement. Plus récemment, de nouvelles techniques ont été étudiées pour la détection du virus du SDRP à partir d'échantillons agrégés de liquides testiculaires et de queues prélevées à la coupe avec l'obtention de bons résultats - Vilalta et al (2018). Les résultats publiés sont meilleurs dans le traitement des liquides de testicules que ceux des queues. Grâce à l'utilisation de liquides issus de ces coupes, il est possible d'échantillonner plus d'animaux et plus fréquemment, ce qui est très utile pour la détection du virus du SDRP lorsque le pourcentage d'animaux porteurs à la naissance est faible. Lorsque le pourcentage de castration des porcelets est faible, l'application pratique de cette technique n'est pas réalisable. En dehors de cela, les restrictions sur la coupe de queues appliqué de manière routinière qui marquent la réglementation européenne sur le bien-être animal limitent également l'utilisation du fluide de queues coupées comme échantillon de choix.

Sur la base de ces directives, objectifs et conditions, l'équipe du Grup de Sanejament Porcí de Lleida en Espagne a développé un projet pour évaluer une nouvelle technique de surveillance basée sur la collecte d'échantillons agrégés de parties de cadavres, stockés dans des conditions de congélation et envoyés au laboratoire avec une fréquence déterminée. La collecte et l'analyse de ce type d'échantillon agrégé et continu nous permet de déterminer à partir de quel moment aucun virus n'est détecté dans les tissus des cadavres.

Après les premiers résultats, il est suggéré que la collecte de morceaux de langue des morts-nés est un bon système pour déterminer s'il y a un virus chez les porcelets à la naissance.

Portion de langue de cadavres comme échantillon de diagnostic

Le système est basé sur la récolte de morceaux de langue d'au moins 2 cm, leur stockage dans des sacs ou récipients au congélateur et leur envoi à la fréquence souhaitée (bande de mises-bas ou mensuelle). Ce système a de bons résultats et de nombreux avantages. La langue a été choisie car c'est un échantillon généralement plus propre que la queue, qui fournit une quantité suffisante de liquide et où il y a également la présence d'autres éléments tels que la salive et le liquide amniotique dans le cas des morts-nés (photo 1). De plus, cela ne nécessite pas de formation technique spécifique et les opérateurs des élevages eux-mêmes peuvent être chargés de prélever des échantillons.

Dans le cas des phases de lactation, post-sevrage ou engraissement, le même système d'échantillonnage est utilisé, une partie des langues étant obtenues à partir des pertes qui surviennent dans ces phases au cours de la période à étudier. Dans ces cas, les échantillons sont stockés séparément dans trois récipients, selon le stade auquel la mortalité s'est produite: début, milieu et fin de post-sevrage ou engraissement.

Cet échantillon agrégé est conservé dans des sacs ou des récipients dans des conditions de congélation jusqu'à ce qu'il soit envoyé au laboratoire de diagnostic. Là, il est traité pour obtenir le fluide extrait des traces de liquide présentes dans les langues.

Avec ce fluide, une PCR est réalisée pour déterminer la présence ou l'absence de virus. Le séquençage de plusieurs parties du génome viral avec la technique de séquençage Sanger a également été possible.

Les exigences de base pour ce système d'échantillonnage sont les suivantes: présence d'un congélateur à l'élevage et suffisamment d'animaux à échantillonner pendant la période d'étude.

Ce système d'échantillonnage présente comme principaux avantages:

• Il permet d'échantillonner plus d'animaux normalement et plus fréquemment. La collecte systématique de la langue de tous les morts-nés et des mortalités en maternité peut être mise en œuvre.
• Il ne nécessite pas de préparation technique compliquée. Les opérateurs de l'élevage peuvent collecter eux-mêmes ce type d'échantillons.
• Il élimine le stress lié à l'a prise d'échantillon chez les animaux vivants.
• La sensibilité et la spécificité de la technique s'améliorent dans certains cas car il s'agit d'un échantillonnage dirigé et d'un plus grand nombre d'animaux échantillonnés.
• La qualité du séquençage Sanger est généralement meilleure que celle des fluides oraux.
• Enfin, le coût de la surveillance est plus faible par rapport aux prises de sang mensuelles traditionnelles.

La surveillance du SDRP à partir d'échantillons de cadavres nous permet d'obtenir des informations d'importance épidémiologique dans les phases où moins d'efforts ont été concentrés sur la surveillance de la présence de virus du SDRP tels que la naissance, le post-sevrage et l'engraissement.